Abstrak
Suplementasi antioksidan pada media kultur bebas serum merupakan strategi umum untuk meningkatkan produktivitas melalui pengurangan stres oksidatif. Dalam studi ini, dihipotesiskan bahwa antioksidan tertentu dapat meningkatkan produktivitas spesifik dari lini sel CHO-GS yang mengekspresikan antibodi bi-spesifik. Sebuah studi penyaringan fed-batch (FB) menyelidiki beberapa antioksidan dan mengungkapkan asam rosmarinat (RoA) dan retinil asetat (RAc), pada tingkat yang lebih rendah, meningkatkan produktivitas sel. Bertentangan dengan laporan literatur sebelumnya, penambahan RoA dan/atau RAc mengakibatkan pertumbuhan sel yang lebih lambat dan kepadatan sel puncak yang viabel berkurang, yang menangkal peningkatan produktivitas spesifik. Kami berhipotesis bahwa suplementasi RoA/RAc setelah fase pertumbuhan eksponensial akan meningkatkan titer melalui peningkatan produktivitas spesifik tanpa secara substansial menghambat pertumbuhan sel. Hipotesis ini diuji dengan tiga cara berbeda: (1) suplementasi RoA/RAc ke umpan, daripada media basal, dalam proses FB; (2) menerapkan mode proses fed-batch intensif (iFB) yang dimulai dengan VCD penyemaian tinggi, melewati fase pertumbuhan sel eksponensial; (3) menambahkan RoA/RAc ke media perfusi fase produksi, daripada media perfusi fase pertumbuhan, dalam proses manufaktur berkelanjutan (CM) berbasis perfusi. Ketiga metode terbukti efektif dalam peningkatan titer, yang mendukung hipotesis tersebut. Selain itu, RoA/RAc berdampak signifikan pada kualitas produk, dengan variasi tergantung pada mode proses dan komponen. Secara keseluruhan, penambahan mereka menyebabkan penurunan persentase N-glycan mannose dan peningkatan fragmentasi dan agregasi produk. Perubahan ini tidak sepenuhnya selaras dengan laporan sebelumnya, yang menyoroti bahwa strategi penambahan perlu dievaluasi secara hati-hati berdasarkan garis sel dan jenis molekul yang diekspresikan.
Peningkatan produktivitas spesifik sel melalui suplementasi antioksidan yang tertunda dalam proses yang diintensifkan
