Abstrak
Salah satu teknik yang banyak digunakan untuk memproduksi partikel rekombinan adeno-associated virus serotype 2 (rAAV2), sebagai vektor virus untuk aplikasi terapi gen, adalah transfeksi triple transient (TT) dari sel human embryonic kidney 293 (HEK293). Proses transfeksi ini diharapkan dapat dioptimalkan untuk pembuatan vektor virus rAAV yang lebih efisien untuk tujuan terapi gen. Kami meneliti aplikasi dimetil sulfoksida (DMSO) sebagai aditif pada teknik transfeksi ini untuk meningkatkan hasil ekspresi partikel rAAV2 dengan sel HEK293 dalam modalitas kultur sel adheren dan suspensi. Bantuan oleh DMSO ini akan meningkatkan pengangkutan DNA plasmid (pDNA) melalui membran sel, dan dengan demikian, meningkatkan titer virus kapsid penuh rAAV2 pada saat pemanenan kultur sel. Studi ini menunjukkan bahwa DMSO sebagai aditif untuk proses transfeksi TT menghasilkan peningkatan 8,2 kali lipat dalam hasil ekspresi kapsid AAV2 lengkap menggunakan sel HEK293 dalam modalitas kultur sel adhesif, dan juga menghasilkan peningkatan 4,0 kali lipat dalam hasil ekspresi kapsid AAV2 lengkap menggunakan sel HEK293 dalam modalitas kultur sel suspensi. Tidak ada studi yang dilaporkan tentang penerapan DMSO sebagai aditif untuk proses transfeksi TT sel HEK293 untuk produksi partikel AAV. Ini adalah metode baru, sederhana, dan murah untuk meningkatkan hasil kapsid lengkap rAAV2 dengan proses transfeksi TT sel HEK293, menggunakan agen krioprotektan (CPA) yang terkenal, sebagai aditif untuk proses transfeksi ini.
PERNYATAAN KONFLIK KEPENTINGAN
Penulis menyatakan tidak ada konflik kepentingan.
