Pengeditan CRISPR pada Garis Sel Vero Meningkatkan Kemampuan Proses Vaksin Virus Hidup dengan Memungkinkan Proteolisis Fibronektin yang Ditargetkan

ABSTRAK
Penghapusan komponen sel inang merupakan penggerak biaya yang signifikan dalam produksi vaksin virus hidup. Proses penyaringan seperti penyaringan aliran tangensial dapat efektif dalam kapasitas ini dengan memanfaatkan perbedaan ukuran relatif antara partikel virus dan protein inang; namun, membran penyaringan dapat dikotori oleh protein yang lebih besar, khususnya protein matriks ekstraseluler. Dalam penelitian ini, kami menggunakan penyuntingan CRISPR untuk memasukkan elemen pengenalan protease TEV yang sangat selektif ke berbagai posisi gen yang mengkode fibronektin dalam genom garis sel Vero, platform umum untuk produksi virus. Dengan menyaring garis sel yang diedit, kami mengidentifikasi garis kandidat yang menjanjikan di mana fibronektin dapat dihilangkan secara efektif dengan memperlakukan dengan protease selama pemrosesan, menghilangkan pengotoran filter dan memungkinkan pemurnian virus tanpa memerlukan langkah-langkah kromatografi yang mahal.